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Western Blotting

介:Western Blotting,又稱蛋白免疫印跡技術(shù),該技術(shù)是檢測組織細(xì)胞中目的蛋白表達(dá)與否,以及目的蛋白表達(dá)水平差異的重要手段。

技術(shù)優(yōu)勢

(1)?????? 高質(zhì)量蛋白提?。?/span>高質(zhì)量蛋白提取是Western成功的關(guān)鍵,本公司采用特定的裂解液以及抑制劑能夠有效提取完整蛋白,尤其對較少樣品的提取具有豐富的經(jīng)驗。

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(2)????? 高分子量(>120 kDa)以及低分子量(<10 kDa)轉(zhuǎn)膜優(yōu)化:采用優(yōu)化的轉(zhuǎn)膜條件以及特有的轉(zhuǎn)膜緩沖液實現(xiàn)高分子量以及低分子量的有效轉(zhuǎn)膜。

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(3)????? 有效降低的雜交背景及非特異性雜交:本公司采用特定的Blocking Buffer以及完善的抗體優(yōu)化條件有效降低非特異性雜交反應(yīng)和降低背景。

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(4)????? 極高靈敏度:本公司采用高靈敏度ECL試劑以及增強劑,對fg級別蛋白也具有較好的檢測效果。

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(5)????? 較為完善的抗體庫:本公司擁有較多的進(jìn)口抗體(Abcam;CST;Millipore; Sigma等公司),特別是信號途徑的關(guān)鍵抗體以及磷酸化抗體,大大減少了客戶抗體購買費用及節(jié)省時間

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6)專業(yè)的光密度分析:本公司擁有非常準(zhǔn)確的光密度分析軟件及經(jīng)驗,對光密度的采集及分析極為準(zhǔn)確。

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客戶須知:

Western Blotting分析

周期

最終提供客戶資料

Western Blotting

10-14個工作日

原始WB檢測膠片(含顯影Marker,便于文章投稿使用)

高分辨率膠片掃描結(jié)果(客戶直接可以放在高水平文章上)

詳細(xì)實驗報告(操作流程及抗體信息)

光密度掃描分析(三次光密度掃描結(jié)果,便于客戶制備柱狀圖)

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案例:

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客戶提供:

樣品類型

組織樣本

細(xì)胞樣品

樣品需要量

100 mg

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1-10×106個(相當(dāng)于六孔板長滿后的一個孔細(xì)胞量)

取樣和保存環(huán)境

新鮮組織:100 mg以上,液氮速凍;

凍存組織:-80 保存, 100 mg以上。

貼壁細(xì)胞:棄培養(yǎng)基,胰酶消化,離心(1000g,5 min),棄去上清;? 加入PBS重懸;然后離心(同上),棄上清;只保留細(xì)胞沉淀,凍存于-80 或干冰直接運輸。

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懸浮細(xì)胞:離心(1000g5 min),棄去上清;加入PBS重懸;然后離心同上,棄上清;只保留細(xì)胞沉淀,凍存于-80 或干冰直接運輸。

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運輸

杭州市內(nèi)干冰上門取樣;

外地客戶干冰快遞運輸。

杭州市內(nèi)干冰上門取樣;

外地客戶干冰快遞運輸。

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*(經(jīng)本公司評估后,實驗沒有結(jié)果,不收取任何費用)

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